γ-谷氨酰基转移酶（γ-GT）是一种存在于肝、胰、肾、脾、肺等组织中的酶，其催化活性浓度的测定对于肝、胆、肾等疾病的诊断和治疗具有重要意义。本标准参考方法采用比色法测定γ-GT催化活性浓度。

1. 原理
γ-GT催化γ-谷氨酰肽和5-硝酸-2-苯基-3-硫代苯咪唑（NBTP）反应生成5-硝酸-2,3-苯基咪唑（NBT），NBT在碱性条件下呈蓝色，其吸光度与γ-GT催化活性浓度成正比关系。

2. 试剂和仪器
（1）NBTP试剂盒
（2）γ-GT标准品
（3）0.1mol/L磷酸盐缓冲液（pH7.4）
（4）0.1mol/L氢氧化钠溶液
（5）0.1mol/L氯化钴溶液
（6）比色计

3. 操作步骤
（1）制备标准曲线
取γ-GT标准品0.1ml，加入0.1mol/L磷酸盐缓冲液1.9ml，混匀，得到γ-GT浓度为0.1U/L的标准液。分别取0.1ml、0.2ml、0.4ml、0.6ml、0.8ml、1.0ml标准液，加入0.1mol/L磷酸盐缓冲液1.9ml，混匀，得到γ-GT浓度分别为0.01U/L、0.02U/L、0.04U/L、0.06U/L、0.08U/L、0.1U/L的标准液。将标准液吸入比色管中，加入NBTP试剂，混匀，放置于37℃恒温水浴中反应10min，加入0.1mol/L氢氧化钠溶液0.5ml，混匀，放置于室温下静置5min，加入0.1mol/L氯化钴溶液0.5ml，混匀，测定吸光度，制备标准曲线。
（2）测定样品
取待测样品0.1ml，加入0.1mol/L磷酸盐缓冲液1.9ml，混匀，加入NBTP试剂，混匀，放置于37℃恒温水浴中反应10min，加入0.1mol/L氢氧化钠溶液0.5ml，混匀，放置于室温下静置5min，加入0.1mol/L氯化钴溶液0.5ml，混匀，测定吸光度。
（3）计算催化活性浓度
根据标准曲线计算出待测样品的γ-GT催化活性浓度。

4. 结果计算
γ-GT催化活性浓度的计算公式为：
γ-GT催化活性浓度（U/L）=（As-A0）/（A1-A0）×γ-GT标准品浓度
其中，As为待测样品的吸光度，A0为空白对照的吸光度，A1为标准曲线上与As最接近的吸光度，γ-GT标准品浓度为0.1U/L。

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