细胞毒性试验是口腔材料生物学评价的重要内容之一,其目的是评估材料对细胞的毒性作用。本标准介绍了两种细胞毒性试验方法:琼脂覆盖法和分子滤过法。
琼脂覆盖法是一种定性的试验方法,适用于评估材料对细胞的直接毒性作用。实验步骤包括:制备琼脂覆盖层、培养细胞、接种材料、观察细胞形态和生长情况等。根据细胞的形态和生长情况,判断材料对细胞的毒性作用。
分子滤过法是一种定量的试验方法,适用于评估材料对细胞的间接毒性作用。实验步骤包括:制备细胞培养物、接种材料、培养细胞、收集培养上清液、过滤上清液、测定滤液中乳酸脱氢酶(LDH)的活性等。根据LDH活性的测定结果,计算出材料对细胞的毒性指数。
在进行细胞毒性试验时,需要注意以下几点:
1. 选择合适的细胞系。不同的细胞系对材料的敏感性不同,应根据实际需要选择合适的细胞系。
2. 控制实验条件。实验室环境、培养基、培养温度、CO2浓度等因素都会影响细胞的生长和代谢,应严格控制实验条件。
3. 重复实验。为了保证实验结果的可靠性,应进行多次重复实验,并计算平均值和标准差。
4. 结果判定。根据实验结果,判断材料对细胞的毒性作用。一般认为,细胞存活率低于70%时,材料具有明显的毒性作用。
5. 报告要求。实验结果应详细记录,并包括实验方法、实验结果、结果分析和结论等内容。
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