淀粉是植物体内的主要储能物质,是生物质能源的重要组成部分。淀粉测定是生物质能源研究中的重要分析方法之一。本标准规定了林业生物质原料淀粉测定的方法,为生物质能源研究提供了技术支持。
1.范围
本标准规定了林业生物质原料淀粉测定的方法。
2.方法概述
将样品经过粉碎、筛分、干燥等处理后,用酶法将淀粉水解成葡萄糖,再用葡萄糖氧化酶法测定葡萄糖含量,从而计算出淀粉含量。
3.仪器和试剂
3.1 仪器
(1)电子天平:分度值为0.0001g;
(2)恒温振荡器:温度范围为20℃~50℃,振荡频率为100~200次/min;
(3)紫外分光光度计:波长范围为340nm~800nm,分辨率为1nm;
(4)离心机:最高转速为10000r/min。
3.2 试剂
(1)淀粉酶:活力为10U/mg以上;
(2)葡萄糖氧化酶:活力为100U/mg以上;
(3)葡萄糖标准溶液:浓度为1mg/mL;
(4)磷酸盐缓冲液:pH值为6.8。
4.样品处理
4.1 样品的制备
将样品去除杂质,粉碎成粉末状,筛分后取适量样品称重,记录样品质量。
4.2 样品的干燥
将样品放入烘箱中,在60℃下干燥至恒重。
5.测定步骤
5.1 样品的水解
将样品加入淀粉酶溶液中,放入恒温振荡器中,振荡1h,然后加入磷酸盐缓冲液,再次振荡1h。
5.2 葡萄糖含量的测定
将水解后的样品离心,取上清液,加入葡萄糖氧化酶溶液,放入恒温振荡器中,振荡30min,然后用紫外分光光度计测定吸光度值。
5.3 淀粉含量的计算
根据葡萄糖标准溶液的吸光度值,绘制标准曲线,计算出样品中葡萄糖的含量,再根据淀粉与葡萄糖的摩尔比例,计算出样品中淀粉的含量。
6.结果的计算与表示
6.1 计算公式
淀粉含量(%)=(样品中葡萄糖含量×162)÷样品质量
6.2 结果的表示
结果保留两位小数,单位为百分数。
7.精密度和准确度
7.1 精密度
同一样品在同一实验室内重复测定3次,相对标准偏差不大于5%。
7.2 准确度
本方法的准确度由样品的加标回收率和对照样品的测定结果确定。加标回收率应在90%~110%之间。
相关标准
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