GB/T 33409-2016
β-半乳糖苷酶活性检测方法 分光光度法
发布时间:2016-12-30 实施时间:2017-07-01
β-半乳糖苷酶是一种重要的酶类,广泛存在于微生物、植物和动物中。它能够催化半乳糖苷的水解,将其分解为葡萄糖和半乳糖。β-半乳糖苷酶在食品、饲料、生物制品等领域中有着广泛的应用,因此对其活性的检测方法也越来越受到关注。
本标准规定了β-半乳糖苷酶活性检测方法的分光光度法。该方法基于酶催化反应,通过测定反应体系中产生的葡萄糖含量来计算β-半乳糖苷酶的活性。具体操作步骤如下:
1. 样品制备:将待测样品加入适量的缓冲液中,混匀后离心,取上清液备用。
2. 反应体系制备:将适量的样品上清液、底物溶液和酶液按照一定比例混合,混匀后放置在恒温水浴中反应一定时间。
3. 反应终止:加入一定量的酸性试剂终止反应。
4. 分光光度测定:将反应液置于分光光度计中,测定在一定波长下的吸光度值。
5. 计算活性:根据标准曲线计算反应体系中产生的葡萄糖含量,进而计算β-半乳糖苷酶的活性。
本标准的实施可以有效地检测β-半乳糖苷酶的活性,具有操作简便、准确度高、重现性好等优点。同时,该方法还具有灵敏度高、适用范围广等特点,可用于食品、饲料、生物制品等领域中β-半乳糖苷酶活性的测定。
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