一、范围
本标准适用于保健食品中葛根素的测定。

二、引用标准
GB/T 6682 分析化学实验室用水规格
GB/T 20394 高效液相色谱法中的术语和定义

三、原理
样品经提取后，采用高效液相色谱法进行分离和测定。

四、仪器设备和试剂
4.1 仪器设备
高效液相色谱仪：具有紫外检测器，流量控制器，进样器等。
色谱柱：C18色谱柱，5μm，4.6mm×250mm。
移液器：1mL，2mL，5mL，10mL。
超声波清洗器：功率大于200W。
电子天平：分辨率0.1mg。
4.2 试剂
甲醇：色谱纯。
乙腈：色谱纯。
磷酸二氢钾：分析纯。
磷酸：分析纯。
水：经GB/T 6682规定的实验室用水。
葛根素标准品：纯度大于98%。

五、样品的处理
5.1 样品的准备
将样品粉末称取0.5g，加入50mL甲醇，超声波处理30min，离心10min，取上清液过滤，取1mL过滤液加入10mL甲醇中，超声波处理5min，离心10min，取上清液过滤，即为待测样品溶液。
5.2 样品的处理
取待测样品溶液1mL，加入10mL甲醇中，超声波处理5min，离心10min，取上清液过滤，即为待测样品溶液。

六、操作步骤
6.1 色谱条件
流动相：甲醇-乙腈-0.05%磷酸二氢钾溶液（30:70:0.1）。
流速：1.0mL/min。
柱温：30℃。
检测波长：254nm。
进样量：20μL。
6.2 标准曲线的绘制
取葛根素标准品0.1mg/mL，1mL，2mL，5mL，10mL，分别加入10mL甲醇中，超声波处理5min，离心10min，取上清液过滤，分别进样，测定峰面积，绘制标准曲线。
6.3 样品的测定
取待测样品溶液1mL，加入10mL甲醇中，超声波处理5min，离心10min，取上清液过滤，进样，测定峰面积，根据标准曲线计算葛根素的含量。

七、计算
样品中葛根素的含量（mg/g）=（样品峰面积/标准曲线斜率）×标准品浓度×稀释倍数/样品质量

八、结果表示
结果保留两位小数，单位为mg/g。

九、精密度和准确度
9.1 精密度
在同一天内，重复测定6个样品，计算相对标准偏差（RSD），RSD不大于2.0%。
9.2 准确度
加入已知量的葛根素标准品，进行回收实验，回收率在95.0%~105.0%之间。

十、质量控制
10.1 仪器的校准
每天使用前进行仪器的校准，包括流量控制器、进样器、检测器等。
10.2 样品的平行测定
对同一样品进行平行测定，计算相对标准偏差（RSD），RSD不大于2.0%。
10.3 空白对照
在同一条件下进行空白对照实验，检测是否有干扰物质。

相关标准
GB/T 20394 高效液相色谱法中的术语和定义
GB/T 6682 分析化学实验室用水规格
GB/T 22250-2008 保健食品中大豆异黄酮的测定
GB/T 22252-2008 保健食品中芦荟多糖的测定
GB/T 22253-2008 保健食品中葡萄籽原花青素的测定