GB/T 5521-2008
粮油检验 谷物及其制品中α-淀粉酶活性的测定 比色法
发布时间:2008-11-04 实施时间:2009-01-01


一、范围
本标准适用于谷物及其制品中α-淀粉酶活性的测定。

二、引用标准
GB/T 191-2008 纸和纸板试样的制备
GB/T 601-2002 粮食、油料和其制品中水分的测定 水分测定法
GB/T 6682-2008 分析化学实验室水质规范及评价
GB/T 6688-2008 分析化学实验室安全规程
GB/T 6689-2008 分析化学实验室通用规定

三、原理
样品中的α-淀粉酶作用于淀粉,将其水解成糖,再经过一系列反应,最终生成一种有色产物,其颜色深浅与样品中α-淀粉酶活性成正比。

四、仪器和设备
1. 恒温水浴器
2. 离心机
3. 比色计

五、试剂和材料
1. 乙醇
2. 磷酸盐缓冲液
3. 淀粉溶液
4. 3,5-二硝基水杨酸
5. 硫酸
6. 氢氧化钠
7. 氯化钠
8. 蒸馏水

六、样品的制备
将样品研磨成粉末,过筛,取适量样品称重。

七、操作步骤
1. 取适量样品,加入磷酸盐缓冲液,淀粉溶液,混匀,放入恒温水浴器中,恒温反应一定时间。
2. 取出反应液,加入3,5-二硝基水杨酸,混匀,放入恒温水浴器中,恒温反应一定时间。
3. 取出反应液,加入氢氧化钠,混匀,放入恒温水浴器中,恒温反应一定时间。
4. 取出反应液,加入氯化钠,混匀,放入离心机中离心。
5. 取出上清液,用比色计测定其吸光度。

八、计算
根据标准曲线计算样品中α-淀粉酶活性的含量。

九、结果表示
样品中α-淀粉酶活性的含量,以单位质量样品中酶活性的国际单位(IU/g)表示。

十、注意事项
1. 操作时应注意安全,避免接触试剂和样品。
2. 操作时应注意卫生,避免污染样品。
3. 操作时应注意精确称量和计时,避免误差。
4. 操作时应注意仪器和设备的清洁和维护,避免影响结果的准确性。

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