1.范围
本标准适用于禽蛋中胆固醇含量的测定。

2.引用标准
GB/T 6682 分析化学实验室水和气的纯度试验方法
GB/T 6688 食品中脂肪酸甲酯的气相色谱法
GB/T 9695.3 食品中脂肪酸甲酯的制备和蒸馏
GB/T 14675 食品中脂肪酸甲酯的气相色谱法
GB/T 19495 食品中脂肪酸甲酯的制备和蒸馏

3.原理
将禽蛋样品中的胆固醇与胆固醇酯酶反应，生成胆固醇酮和脂肪酸甲酯，再将脂肪酸甲酯转化为甲醇和脂肪酸，通过气相色谱法测定甲醇的含量，计算出禽蛋中胆固醇的含量。

4.仪器和设备
1.电子天平
2.恒温振荡器
3.离心机
4.紫外分光光度计
5.气相色谱仪

5.试剂和材料
1.胆固醇酯酶
2.甲醇
3.氯仿
4.硫酸钠
5.氢氧化钠
6.氯化钠
7.禽蛋样品

6.操作步骤
1.样品制备：将禽蛋样品打碎，称取1g，加入10mL氯仿，振荡10min，离心5min，取上清液备用。
2.酶解反应：取上述上清液2mL，加入0.1mL胆固醇酯酶，恒温振荡1h。
3.甲醇转化：将上述反应液加入2mL甲醇，加热至70℃，恒温振荡30min。
4.提取甲醇：加入2mL氯仿，振荡1min，离心5min，取上清液。
5.气相色谱测定：将上述上清液注入气相色谱仪，测定甲醇的含量。
6.计算：根据甲醇的含量计算出禽蛋中胆固醇的含量。

7.结果表示
禽蛋中胆固醇含量的计算公式为：C=（A-B）/V×D×1000
其中，C为禽蛋中胆固醇含量，mg/100g；
A为样品经酶解反应后测得的甲醇含量，mg/L；
B为空白对照的甲醇含量，mg/L；
V为样品体积，L；
D为禽蛋样品的稀释倍数。

8.精密度和准确度
本方法的相对标准偏差（RSD）不大于5%。

9.质量控制
1.每批样品应设置空白对照和标准品对照。
2.标准品应根据GB/T 14675或GB/T 19495制备。

10.报告内容
1.样品的名称、编号、重量、体积等信息。
2.测定结果，包括胆固醇含量和相对标准偏差。
3.实验条件和操作步骤。
4.仪器和设备的名称、型号和生产厂家。
5.试剂和材料的名称、批号和生产厂家。

相关标准
GB/T 6682 分析化学实验室水和气的纯度试验方法
GB/T 6688 食品中脂肪酸甲酯的气相色谱法
GB/T 9695.3 食品中脂肪酸甲酯的制备和蒸馏
GB/T 14675 食品中脂肪酸甲酯的气相色谱法
GB/T 19495 食品中脂肪酸甲酯的制备和蒸馏