一、范围
本标准适用于番茄制品中番茄红素、叶黄素、胡萝卜素含量的测定。
二、引用标准
GB/T 6682 分析化学实验室用水规格
GB/T 6688 食品添加剂 水杨酸及其钠盐的测定 高效液相色谱法
GB/T 20394 食品安全国家标准 食品中农药最大残留限量
GB/T 22510 食品安全国家标准 食品中兽药最大残留限量
GB/T 24683 食品安全国家标准 食品中非法添加物和非法使用物质的检测方法
三、定义
3.1 番茄红素
番茄红素是一种类胡萝卜素,是番茄中的主要色素成分。
3.2 叶黄素
叶黄素是一种类胡萝卜素,是植物中的主要黄色素成分。
3.3 胡萝卜素
胡萝卜素是一类类胡萝卜素,是植物中的主要黄色素成分。
四、原理
样品经提取后,采用超高效液相色谱法进行分离,通过检测番茄红素、叶黄素、胡萝卜素的特征峰进行定量分析。
五、仪器设备和试剂
5.1 仪器设备
超高效液相色谱仪、色谱柱、样品处理仪器、电子天平、pH计等。
5.2 试剂
甲醇、乙腈、乙酸乙酯、乙酸、水等。
六、样品处理
6.1 样品的准备
将番茄制品样品取适量,粉碎均匀,称取1g,加入10mL甲醇,超声提取30min,离心10min,取上清液过滤,取1mL上清液加入10mL甲醇中,摇匀,离心10min,取上清液过滤,即为待测样品。
6.2 样品的稀释
取待测样品1mL,加入10mL甲醇中,摇匀,离心10min,取上清液过滤,即为稀释液。
七、操作步骤
7.1 色谱条件
色谱柱:C18色谱柱(2.1mm×100mm,1.8μm)
流动相:甲醇-乙腈-乙酸乙酯-乙酸-水(15:15:15:0.5:54.5)
流速:0.3mL/min
柱温:30℃
检测波长:472nm
7.2 样品的测定
取稀释液1mL,加入色谱柱前处理器中,进行过滤,取上清液注入超高效液相色谱仪中进行测定。
八、计算
8.1 计算公式
番茄红素、叶黄素、胡萝卜素的含量分别按下式计算:
C=(A×V×D)/(ε×m)
式中:
C——番茄红素、叶黄素、胡萝卜素的含量,mg/kg;
A——峰面积;
V——取样体积,mL;
D——稀释倍数;
ε——摩尔吸光系数,L/(mol·cm);
m——样品质量,g。
8.2 计算结果的处理
计算结果保留两位小数,四舍五入。
九、质量控制
9.1 样品的平行测定
同一批次的样品,取3份进行平行测定,结果的相对标准偏差不得大于5%。
9.2 标准品的测定
每个批次的样品测定前,应测定标准品,标准品的相对标准偏差不得大于5%。
十、结果报告
测定结果应包括样品的名称、编号、测定日期、测定人员、测定方法、测定结果等内容。
相关标准
GB/T 6682 分析化学实验室用水规格
GB/T 6688 食品添加剂 水杨酸及其钠盐的测定 高效液相色谱法
GB/T 20394 食品安全国家标准 食品中农药最大残留限量
GB/T 22510 食品安全国家标准 食品中兽药最大残留限量
GB/T 24683 食品安全国家标准 食品中非法添加物和非法使用物质的检测方法