GB/T 18085-2000
植物检疫 小麦矮化腥黑穗病菌检疫鉴定方法
发布时间:2000-04-26 实施时间:2000-10-01
一、范围
本标准规定了小麦矮化腥黑穗病菌的检疫鉴定方法,包括样品采集、处理、分离、鉴定等步骤。适用于小麦矮化腥黑穗病菌的检疫鉴定。
二、样品采集
1. 采集疑似感染小麦矮化腥黑穗病菌的植株,包括叶片、茎、穗等部位。
2. 样品应在采集后立即送检,或者在4℃条件下保存,不得超过24小时。
三、样品处理
1. 取样品0.5g,加入10ml蒸馏水中,用搅拌器搅拌均匀。
2. 取1ml悬液,加入9ml蒸馏水中,制成10^-1稀释液。
3. 取1ml稀释液,加入9ml蒸馏水中,制成10^-2稀释液。
四、分离
1. 取10^-1稀释液0.1ml,均匀涂布在小麦矮化腥黑穗病菌选择性培养基上,放置在28℃恒温箱中培养3-5天。
2. 从培养基上挑选典型菌落,进行纯化。
五、鉴定
1. 形态学鉴定:观察菌落形态、大小、颜色等特征。
2. 生理生化鉴定:进行氧化酶、嗜热反应、酸碱反应等生理生化试验。
3. 分子生物学鉴定:进行PCR扩增、序列分析等分子生物学方法。
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