饲料中免疫球蛋白IgG的测定是饲料质量控制的重要指标之一。本标准采用高效液相色谱法测定饲料中免疫球蛋白IgG的含量。

1. 原理
将饲料样品中的免疫球蛋白IgG与特异性抗体结合，形成免疫复合物，经过固相萃取柱富集，再通过高效液相色谱分离，检测器检测，计算出样品中免疫球蛋白IgG的含量。

2. 试剂和仪器
2.1 试剂
（1）甲醇：色谱纯。
（2）乙腈：色谱纯。
（3）磷酸盐缓冲液：pH 7.4，含有0.1%的Tween-20。
（4）特异性抗体：兔抗鸡IgG。
（5）免疫球蛋白IgG标准品：纯度≥95%。
（6）其他常规试剂。

2.2 仪器
（1）高效液相色谱仪。
（2）紫外检测器。
（3）固相萃取柱。

3. 样品处理
3.1 样品的准备
将饲料样品称取1g，加入10mL的磷酸盐缓冲液中，振荡混合，离心10min，取上清液，过滤。

3.2 样品的富集
将上述处理后的样品加入特异性抗体固相萃取柱中，洗脱后得到免疫球蛋白IgG的富集物。

4. 色谱条件
4.1 色谱柱：C18色谱柱。
4.2 流动相：甲醇-乙腈-磷酸盐缓冲液（30:30:40）。
4.3 流速：1.0mL/min。
4.4 检测波长：280nm。

5. 结果计算
根据免疫球蛋白IgG标准品的峰面积和浓度，绘制标准曲线。将样品的峰面积代入标准曲线中，计算出样品中免疫球蛋白IgG的含量。

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