土霉素是一种广谱抗生素，常用于畜禽饲料中，以预防和治疗动物的疾病。然而，土霉素的滥用会导致畜禽体内残留，对人体健康造成潜在威胁。因此，对饲料中土霉素的含量进行准确测定具有重要意义。

本标准采用高效液相色谱法测定饲料中土霉素的含量。具体操作步骤如下：

1. 样品制备

将饲料样品粉碎并筛选，取约1g样品加入50mL离子交换水中，振荡混合10min，离心10min，取上清液过滤，取10mL过滤液加入10mL甲醇中，振荡混合10min，离心10min，取上清液过滤，即为待测样品。

2. 标准曲线制备

取土霉素标准品，加入甲醇中制备1mg/mL的土霉素标准溶液。取不同浓度的土霉素标准溶液，分别加入甲醇中制备不同浓度的土霉素标准曲线溶液。

3. 色谱条件

色谱柱：C18色谱柱，4.6mm×250mm，5μm

流动相：甲醇-0.05mol/L磷酸二氢钾缓冲液（70:30）

流速：1.0mL/min

检测波长：254nm

进样量：20μL

4. 操作步骤

将待测样品和标准曲线溶液分别注入高效液相色谱仪中，按照上述色谱条件进行分析。根据标准曲线计算出待测样品中土霉素的含量。

相关标准
GB/T 22258-2008 饲料中链霉素的测定 高效液相色谱法
GB/T 22260-2008 饲料中四环素的测定 高效液相色谱法
GB/T 22261-2008 饲料中氯霉素的测定 高效液相色谱法
GB/T 22262-2008 饲料中磺胺类药物的测定 高效液相色谱法
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