蜂胶是蜜蜂采集植物芽、树皮、树脂等物质,经过加工后形成的一种黄色至棕色的胶状物质。蜂胶具有抗菌、抗炎、抗氧化等多种生物活性,被广泛应用于保健品、化妆品、医药等领域。其中,阿魏酸是蜂胶中的一种重要成分,具有抗菌、抗炎、抗氧化等多种生物活性。因此,准确测定蜂胶中阿魏酸的含量对于评价蜂胶的质量和功效具有重要意义。
本标准采用液相色谱-紫外检测法测定蜂胶中阿魏酸的含量。具体操作步骤如下:
1. 仪器和试剂
(1)高效液相色谱仪(HPLC);
(2)紫外检测器;
(3)色谱柱:C18色谱柱,5μm,4.6mm×250mm;
(4)移液器、量筒、瓶塞、滤膜等。
2. 样品的制备
将蜂胶样品粉碎,取适量样品称入50mL量瓶中,加入甲醇至刻度线,摇匀,过滤,取滤液10mL,加入50mL量瓶中,用甲醇稀释至刻度线,摇匀,即得样品溶液。
3. 色谱条件
(1)流动相:甲醇-水(含0.1%磷酸)(70:30);
(2)流速:1.0mL/min;
(3)柱温:30℃;
(4)检测波长:254nm;
(5)进样量:20μL。
4. 标准曲线的绘制
取一定量的阿魏酸标准品,按照上述方法制备不同浓度的标准溶液,分别进行色谱分析,得到峰面积与浓度的线性关系,绘制标准曲线。
5. 样品的测定
按照上述方法进行样品的色谱分析,测定峰面积,根据标准曲线计算出样品中阿魏酸的含量。
6. 结果的计算
样品中阿魏酸的含量(mg/g)=样品中阿魏酸峰面积/标准曲线斜率×进样量/样品质量。
相关标准
GB/T 5009.33-2017 食品中阿魏酸的测定 高效液相色谱法
GB/T 5009.28-2017 食品中总黄酮的测定 高效液相色谱法
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