：
马杜霉素铵是一种广泛应用于畜禽饲料中的抗生素，但其过量使用会对人体健康产生危害。因此，对饲料中马杜霉素铵的测定显得尤为重要。本标准采用高效液相色谱法测定饲料中马杜霉素铵的含量。

1. 原理
将样品经提取、净化后，采用高效液相色谱法进行测定。样品中的马杜霉素铵在特定条件下与荧光标记的试剂发生反应，生成荧光化合物，通过荧光检测器检测荧光信号，计算出样品中马杜霉素铵的含量。

2. 仪器和设备
（1）高效液相色谱仪
（2）荧光检测器
（3）样品制备设备

3. 试剂和材料
（1）甲醇
（2）乙腈
（3）乙酸
（4）乙酸乙酯
（5）氯仿
（6）硫酸
（7）氢氧化钠
（8）马杜霉素铵标准品
（9）荧光试剂

4. 样品制备
（1）取样品5g，加入50mL甲醇，超声提取30min，离心10min，取上清液；
（2）将上清液转移至新离心管中，加入5mL氯仿，振荡混合，离心10min，取上清液；
（3）将上清液转移至新离心管中，加入5mL乙酸乙酯，振荡混合，离心10min，取上清液；
（4）将上清液转移至新离心管中，加入5mL氢氧化钠溶液，振荡混合，离心10min，取上清液；
（5）将上清液转移至新离心管中，加入5mL硫酸，振荡混合，离心10min，取上清液；
（6）将上清液转移至新离心管中，加入5mL乙酸，振荡混合，离心10min，取上清液；
（7）将上清液转移至新离心管中，加入5mL乙腈，振荡混合，离心10min，取上清液；
（8）将上清液转移至新离心管中，加入5mL乙酸乙酯，振荡混合，离心10min，取上清液；
（9）将上清液转移至新离心管中，加入荧光试剂，振荡混合，离心10min，取上清液。

5. 操作步骤
（1）将样品制备好的上清液注入高效液相色谱仪中；
（2）设置色谱条件，进行分离；
（3）通过荧光检测器检测荧光信号；
（4）根据标准曲线计算样品中马杜霉素铵的含量。

6. 结果计算
样品中马杜霉素铵的含量，按下式计算：
C = (A-B)/a
其中，C为样品中马杜霉素铵的含量，μg/g；
A为样品荧光峰面积；
B为空白荧光峰面积；
a为标准曲线斜率，μg/mL。

相关标准：
GB/T 5009.60-2003 食品中磺胺类药物残留量的测定 高效液相色谱法
GB/T 5009.155-2016 食品中氯霉素、马杜霉素、土霉素、链霉素、磺胺类药物残留量的测定 高效液相色谱法
GB/T 23874-2009 饲料中土霉素的测定
GB/T 23875-2009 饲料中链霉素的测定
GB/T 23876-2009 饲料中磺胺类药物的测定