GB/T 25170-2010
畜禽基因组BAC文库构建与保存技术规程
发布时间:2010-09-26 实施时间:2011-03-01


畜禽基因组BAC文库是指将畜禽基因组DNA片段插入到BAC载体中,构建出的基因组文库。该文库是畜禽基因组研究的重要工具,可用于基因克隆、物种进化、基因组比较等方面的研究。本标准旨在规范畜禽基因组BAC文库的构建和保存,保证文库的质量和可靠性。

1. 文库构建
1.1 DNA提取
畜禽组织样品的DNA提取应符合GB/T 19489-2008《动物组织基因组DNA提取试剂盒》的要求。提取的DNA应具有高质量和高分子量,以保证文库的质量和稳定性。
1.2 DNA片段制备
将DNA样品通过限制性内切酶切割成大小适宜的DNA片段,一般为100-200 kb。切割后的DNA片段应进行品质检测,以保证文库的质量和稳定性。
1.3 BAC载体制备
BAC载体应选用高质量的BAC载体,如pBACe3.6等。载体应进行线性化处理,以便于DNA片段的插入。
1.4 DNA片段插入
将DNA片段插入到线性化的BAC载体中,形成畜禽基因组BAC文库。插入后的文库应进行筛选和鉴定,以保证文库的质量和稳定性。

2. 文库保存
2.1 冻存条件
畜禽基因组BAC文库应在-80℃以下的低温条件下保存。保存过程中应避免文库的冻融循环,以保证文库的质量和稳定性。
2.2 文库管理
畜禽基因组BAC文库应进行管理,包括文库信息的记录、文库的备份和文库的更新等。文库管理应符合实验室的管理规定和标准要求。

3. 文库质量控制
3.1 文库质量检测
畜禽基因组BAC文库应进行质量检测,包括文库的插入率、文库的覆盖度、文库的纯度等指标的检测。检测结果应符合实验室的标准要求。
3.2 文库质量评估
畜禽基因组BAC文库应进行质量评估,包括文库的可重复性、文库的稳定性、文库的可靠性等指标的评估。评估结果应符合实验室的标准要求。

相关标准
GB/T 19489-2008 动物组织基因组DNA提取试剂盒
GB/T 19490-2008 植物组织基因组DNA提取试剂盒
GB/T 19491-2008 微生物基因组DNA提取试剂盒
GB/T 19492-2008 真菌基因组DNA提取试剂盒
GB/T 19493-2008 病毒基因组DNA提取试剂盒