柑桔黄龙病是一种由黄龙病菌引起的病害，对柑桔产业造成了严重的危害。因此，对柑桔黄龙病菌的检测方法研究具有重要意义。本标准提供了一种实时荧光PCR检测方法，具有快速、准确、灵敏等优点。

1. 范围
本标准适用于柑桔黄龙病菌的检测。

2. 样品处理
样品采集后，应立即送至实验室进行处理。样品处理包括样品的消毒、切割、挤压等步骤，以保证提取到的DNA质量和数量。

3. DNA提取
DNA提取是本方法的关键步骤之一。本标准推荐使用商用DNA提取试剂盒进行提取，也可以采用传统的酚/氯仿法进行提取。提取后的DNA应进行纯化和浓缩，以保证PCR反应的灵敏度和特异性。

4. PCR反应体系
PCR反应体系包括PCR反应缓冲液、酶、引物、探针等。本标准推荐使用商用PCR试剂盒进行PCR反应，也可以自行配置PCR反应体系。PCR反应体系的优化是本方法的关键之一，应根据实验室的具体情况进行优化。

5. PCR程序
PCR程序包括PCR反应的温度和时间等参数。本标准推荐使用商用PCR仪进行PCR反应，也可以使用其他PCR仪进行PCR反应。PCR程序的优化是本方法的关键之一，应根据实验室的具体情况进行优化。

6. 数据分析
数据分析包括荧光曲线分析、阈值分析、阳性对照和阴性对照等。数据分析的准确性和可靠性是本方法的关键之一，应根据实验室的具体情况进行优化。

相关标准
GB/T 28061-2011 柑桔黄龙病菌检疫处理方法
GB/T 28063-2011 柑桔黄龙病菌检测方法
GB/T 28064-2011 柑桔黄龙病菌检测试剂盒
GB/T 28065-2011 柑桔黄龙病菌检测仪器
GB/T 28066-2011 柑桔黄龙病菌检测结果判定方法