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赭曲霉毒素A是一种常见的饲料中的真菌毒素,对动物健康有很大的危害。因此,对饲料中赭曲霉毒素A的测定非常重要。本标准采用免疫亲和柱净化和高效液相色谱法,能够准确、快速地测定饲料中赭曲霉毒素A的含量。
1.范围
本标准适用于饲料中赭曲霉毒素A的测定。
2.仪器和试剂
2.1 仪器
(1)高效液相色谱仪
(2)光度检测器
(3)离心机
(4)pH计
(5)电子天平
(6)真空泵
(7)移液器
(8)超声波清洗器
(9)离心管
(10)磁力搅拌器
(11)微孔过滤器
(12)注射器
(13)毛细管柱
2.2 试剂
(1)赭曲霉毒素A标准品
(2)PBS缓冲液
(3)PBS-T缓冲液
(4)BSA溶液
(5)免疫亲和柱
(6)甲醇
(7)乙腈
(8)乙酸
(9)水
3.样品的制备
3.1 样品的准备
将饲料样品粉碎并筛选,取1g样品加入50ml离子交换水中,超声处理10min,离心10min,取上清液备用。
3.2 样品的提取
取上述上清液5ml,加入5ml甲醇,超声处理10min,离心10min,取上清液备用。
4.免疫亲和柱净化
将上述提取液加入免疫亲和柱中,洗涤后用PBS-T缓冲液洗涤,最后用PBS缓冲液洗涤,收集洗涤液。
5.高效液相色谱分析
将上述洗涤液过滤后,用高效液相色谱法进行分析。
6.结果的计算
根据高效液相色谱法的峰面积计算赭曲霉毒素A的含量。
相关标准:
GB/T 5009.22-2003 食品中真菌毒素的测定 高效液相色谱法
GB/T 18979-2003 饲料中赭曲霉毒素的测定 高效液相色谱法
GB/T 23533-2009 饲料中赭曲霉毒素的测定 液相色谱-串联质谱法
GB/T 23534-2009 饲料中赭曲霉毒素的测定 液相色谱-荧光检测法
GB/T 23535-2009 饲料中赭曲霉毒素的测定 液相色谱-紫外检测法