蜂胶是蜜蜂采集植物芽、树皮、树脂等物质，经过加工后形成的一种黄色或棕色的胶状物质。蜂胶具有抗菌、抗炎、抗氧化等多种生物活性，被广泛应用于保健品、化妆品、食品等领域。其中，杨树胶是蜂胶中的一种重要成分，具有增强免疫力、抗肿瘤等功效。因此，准确测定蜂胶中杨树胶的含量对于保证蜂胶的质量和功效具有重要意义。

本标准采用高效液相色谱法测定蜂胶中杨树胶的含量。具体操作步骤如下：

1. 仪器和试剂
（1）高效液相色谱仪：采用反相色谱柱，检测波长为280 nm。
（2）甲醇、乙腈、水、磷酸二氢钾、磷酸氢二钠、磷酸三钠、氢氧化钠、氢氯酸等试剂。

2. 样品制备
将蜂胶样品取1 g，加入10 mL甲醇中，超声处理30 min，离心10 min，取上清液过滤，取1 mL过滤液加入10 mL乙腈中，超声处理30 min，离心10 min，取上清液过滤，即为待测样品。

3. 标准曲线制备
取适量的杨树胶标准品，加入适量的甲醇中，制备不同浓度的标准溶液，分别注入高效液相色谱仪中，测定峰面积，绘制标准曲线。

4. 检测样品
将待测样品注入高效液相色谱仪中，测定峰面积，根据标准曲线计算出杨树胶的含量。

5. 结果计算
样品中杨树胶的含量，按下式计算：
C=Cs×As/As
其中，C为样品中杨树胶的含量，Cs为标准曲线上对应峰面积的杨树胶含量，As为样品中杨树胶的峰面积。

6. 精密度和准确度
重复测定6次，计算相对标准偏差（RSD），RSD不得大于5%。

相关标准
GB/T 5009.33-2016 食品中杨树胶的测定 高效液相色谱法
GB/T 5009.35-2016 食品中蜂胶的测定 高效液相色谱法
GB/T 5009.36-2016 食品中蜂胶中总黄酮的测定 高效液相色谱法
GB/T 5009.37-2016 食品中蜂胶中总黄酮酸的测定 高效液相色谱法
GB/T 5009.38-2016 食品中蜂胶中总黄酮醇的测定 高效液相色谱法