草种子的生活力是指种子在一定条件下发芽和生长的能力。生活力是衡量种子品质的重要指标之一。本标准规定了草种子生活力的生物化学(四唑)测定方法。

本标准适用于草种子的生活力测定。

1.范围
本标准规定了草种子生活力的生物化学(四唑)测定方法。

2.引用标准
GB/T 191-2008 纯净度的测定
GB/T 601-2018 粮食、油料和饲料中水分的测定 水分滴定法
GB/T 602-2018 粮食、油料和饲料中水分的测定 烘干法
GB/T 6678-2008 粮食、油料和饲料中脂肪酸甲酯的测定 气相色谱法
GB/T 6682-2008 粮食、油料和饲料中灰分的测定

3.测定原理
草种子生活力的生物化学(四唑)测定是利用四唑类化合物的荧光特性，测定草种子中四唑类化合物的含量，从而反映草种子的生活力。

4.仪器设备和试剂
4.1 仪器设备
- 荧光分光光度计
- 恒温水浴器
- 离心机
- 滤膜

4.2 试剂
- 甲醇
- 乙酸乙酯
- 氯仿
- 乙醇
- 氢氧化钠
- 氯化钠
- 四唑标准品

5.样品的制备
5.1 样品的准备
取草种子样品，按照GB/T 191-2008的规定进行纯度测定，去除杂质和不良种子。

5.2 样品的处理
将样品粉碎，过筛，取适量样品，称定质量。

6.操作步骤
6.1 标准曲线的绘制
取四唑标准品，按照一定的浓度比例配制标准曲线。

6.2 样品的提取
将样品加入甲醇中，加入乙酸乙酯和氯仿，振荡混合，离心分离，取上层液，加入乙醇，振荡混合，离心分离，取上层液，加入氢氧化钠，振荡混合，离心分离，取上层液，加入氯化钠，振荡混合，离心分离，取上层液，过滤。

6.3 荧光测定
将样品加入荧光分光光度计中，测定荧光强度。

7.计算
根据标准曲线计算样品中四唑类化合物的含量，从而得出草种子的生活力。

8.结果表示
测定结果保留两位小数，单位为mg/kg。

9.质量控制
9.1 重复性
同一样品进行3次测定，结果的相对标准偏差不得大于5%。

9.2 平行样
同一样品进行2次测定，结果的相对标准偏差不得大于5%。

10.报告
测定结果应包括样品名称、样品编号、测定日期、测定人员、测定结果等内容。

相关标准
GB/T 191-2008 纯净度的测定
GB/T 601-2018 粮食、油料和饲料中水分的测定 水分滴定法
GB/T 602-2018 粮食、油料和饲料中水分的测定 烘干法
GB/T 6678-2008 粮食、油料和饲料中脂肪酸甲酯的测定 气相色谱法
GB/T 6682-2008 粮食、油料和饲料中灰分的测定