GB/T 36820-2018
甘蔗条纹花叶病毒实时荧光反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测方法
发布时间:2018-09-17 实施时间:2019-04-01
甘蔗条纹花叶病毒是一种重要的甘蔗病毒病害,能够引起甘蔗的叶片、茎秆、花序等部位的病变,导致甘蔗减产甚至死亡。因此,对甘蔗条纹花叶病毒的检测具有重要的意义。
本标准采用实时荧光反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,通过检测甘蔗中的甘蔗条纹花叶病毒核酸,来判断甘蔗是否感染了该病毒。该方法具有灵敏度高、特异性强、快速、准确等优点。
具体操作步骤如下:
1. 样品处理:将甘蔗样品取适量,经过粉碎、离心等处理,提取其中的核酸。
2. RT-PCR反应体系制备:按照标准要求,制备RT-PCR反应体系,包括引物、探针、酶、缓冲液等。
3. RT-PCR反应:将样品核酸加入到RT-PCR反应体系中,进行反应。反应过程中,通过实时荧光检测技术,检测反应体系中的荧光信号变化,来判断样品中是否存在甘蔗条纹花叶病毒。
4. 结果判读:根据荧光信号变化情况,判断样品中是否存在甘蔗条纹花叶病毒。如果荧光信号呈指数增长曲线,且达到了设定的阈值,则判定为阳性;如果荧光信号呈线性增长曲线,或者未达到设定的阈值,则判定为阴性。
本标准还规定了RT-PCR反应体系的制备方法、反应条件、结果判读标准等内容,以确保检测结果的准确性和可靠性。
相关标准
GB/T 36819-2018 甘蔗条纹花叶病毒检疫处理方法
GB/T 36821-2018 甘蔗条纹花叶病毒检测技术规范
GB/T 36822-2018 甘蔗条纹花叶病毒检测试剂盒
GB/T 36823-2018 甘蔗条纹花叶病毒检测质量控制方法
GB/T 36824-2018 甘蔗条纹花叶病毒检测结果判读标准