对虾肝胰腺细小病毒病是一种常见的对虾病害,其病原体为对虾肝胰腺细小病毒(Hepatopancreatic parvovirus,HPV)。该病毒主要感染对虾的肝胰腺组织,导致对虾的生长受阻、免疫力下降等症状,严重时可导致对虾死亡。因此,对虾肝胰腺细小病毒病的诊断对于对虾养殖业的健康发展至关重要。
本标准规定了对虾肝胰腺细小病毒病PCR检测法的诊断规程。具体内容如下:
1. 样品采集
样品采集应选择病虾或疑似病虾,采集肝胰腺组织或全身组织。采集后应立即置于液氮中或-80℃冰箱中保存。
2. 核酸提取
核酸提取应采用适当的方法,如商用核酸提取试剂盒等。提取后的核酸应立即进行PCR检测或置于-20℃冰箱中保存。
3. PCR反应体系
PCR反应体系应包括PCR反应缓冲液、酶、引物、模板DNA等。具体反应体系应根据实验室条件和引物设计情况进行优化。
4. PCR程序
PCR程序应根据引物设计情况进行优化,包括反应温度、时间等。一般情况下,PCR程序应包括预变性、变性、退火、延伸等步骤。
5. 结果判定
PCR结果应根据阳性对照和阴性对照进行判定。阳性对照应为已知含有对虾肝胰腺细小病毒的样品,阴性对照应为无对虾肝胰腺细小病毒的样品。PCR结果应根据扩增产物的大小和数量进行判定。
相关标准
GB/T 40254-2021 对虾肝胰腺细小病毒病诊断规程 细胞培养法
GB/T 40256-2021 对虾肝胰腺细小病毒病诊断规程 免疫学检测法
GB/T 40257-2021 对虾肝胰腺细小病毒病诊断规程 病理学检测法
GB/T 40258-2021 对虾肝胰腺细小病毒病诊断规程 电子显微镜检测法
GB/T 40259-2021 对虾肝胰腺细小病毒病诊断规程 病原学检测法