斑节对虾杆状病毒病是一种常见的对虾病害，严重影响对虾养殖业的发展。为了及时、准确地诊断斑节对虾杆状病毒病，保障对虾养殖业的健康发展，本标准制定了斑节对虾杆状病毒病PCR检测法的诊断规程。

1.适用范围
本标准适用于斑节对虾杆状病毒病的PCR检测。

2.样品采集
2.1 对虾样品采集
对虾样品采集应在对虾死亡后24小时内进行，采集部位为对虾体表、肌肉、肝胰腺、淋巴组织等部位。
2.2 水样采集
水样采集应在对虾死亡后24小时内进行，采集部位为对虾养殖池塘、水源等。

3.核酸提取
3.1 样品处理
对虾样品应先去除外壳、肌肉等组织，留下肝胰腺、淋巴组织等部位，水样直接进行处理。
3.2 核酸提取
核酸提取应采用商用试剂盒或自制试剂盒，提取的核酸应具有高纯度和高质量。

4.PCR反应体系
PCR反应体系应包括模板DNA、引物、酶、缓冲液、dNTPs等组分，其中引物应选择与斑节对虾杆状病毒病相关的特异性引物。

5.PCR程序
PCR程序应根据引物的特异性和PCR反应体系的组成进行优化，包括反应温度、反应时间、循环次数等参数。

6.结果判定
PCR结果应根据阳性对照和阴性对照进行判定，同时应进行电泳检测，确认PCR产物的大小和特异性。

相关标准
GB/T 40250-2021 斑节对虾杆状病毒病诊断规程 免疫学检测法
GB/T 40251-2021 斑节对虾杆状病毒病诊断规程 细胞培养法
GB/T 40252-2021 斑节对虾杆状病毒病诊断规程 病理学检测法
GB/T 40253-2021 斑节对虾杆状病毒病诊断规程 传统PCR检测法
GB/T 40254-2021 斑节对虾杆状病毒病诊断规程 实时荧光定量PCR检测法