饲料中淀粉总含量是饲料中的一个重要指标，对于饲料的营养价值和生产效益具有重要意义。本标准采用酶法测定饲料中淀粉总含量，具有操作简便、准确可靠等优点。

1.范围
本标准规定了饲料中淀粉总含量的测定方法。

2.引用标准
GB/T 6682 分析化学实验室水质规范及评价准则
GB/T 6688 分析化学实验室安全规程
GB/T 8170 数字表示法和圆整规则
GB/T 13610 通用技术条件
GB/T 19580 饲料中淀粉含量的测定

3.原理
将饲料样品加入淀粉酶水解，水解后的淀粉转化为葡萄糖，再用葡萄糖氧化酶催化葡萄糖生成过氧化氢，过氧化氢与草酸反应生成草酸二酐，草酸二酐与铁离子反应生成紫色络合物，根据紫色络合物的吸光度测定饲料中淀粉总含量。

4.仪器和设备
4.1 恒温水浴器
4.2 离心机
4.3 分光光度计
4.4 称量器
4.5 恒温振荡器

5.试剂和材料
5.1 淀粉酶
5.2 葡萄糖氧化酶
5.3 过氧化氢
5.4 草酸
5.5 铁离子
5.6 磷酸盐缓冲液
5.7 紫外可见分光光度计级纯水
5.8 饲料样品

6.操作步骤
6.1 取适量饲料样品，粉碎并筛选过筛网，称取0.5g左右的样品，加入50ml磷酸盐缓冲液中，振荡混合均匀。
6.2 将样品放入恒温水浴器中，恒温30min，取出后离心10min，取上清液。
6.3 取上清液1ml，加入1ml淀粉酶，恒温水浴器中恒温30min，取出后加入1ml葡萄糖氧化酶，恒温水浴器中恒温30min。
6.4 取出后加入1ml过氧化氢，恒温水浴器中恒温30min，取出后加入1ml草酸，恒温水浴器中恒温30min。
6.5 取出后加入1ml铁离子，恒温水浴器中恒温30min，取出后加入1ml紫外可见分光光度计级纯水，混合均匀。
6.6 用分光光度计在510nm处测定吸光度，以磷酸盐缓冲液为对照，计算饲料中淀粉总含量。

7.结果计算
饲料中淀粉总含量的计算公式为：淀粉总含量（%）=（A-B）/C×D×100%
其中，A为样品吸光度，B为对照吸光度，C为样品质量（g），D为淀粉酶的酶解倍数。

8.质量控制
8.1 重复性：同一样品进行3次测定，相对标准偏差不得大于2%。
8.2 平行测定：同一样品进行2次测定，相对误差不得大于2%。
8.3 加标回收率：在样品中加入已知量的淀粉，进行测定，回收率应在95%~105%之间。

9.报告
测定结果应包括样品名称、样品编号、测定日期、测定人员、测定方法、测定结果等内容。

相关标准
GB/T 19580 饲料中淀粉含量的测定
GB/T 6434 饲料中粗蛋白质的测定
GB/T 6435 饲料中粗脂肪的测定
GB/T 6436 饲料中粗纤维的测定
GB/T 6437 饲料中灰分的测定