一、范围
本标准适用于各种类型的水样，包括自来水、地下水、河水、湖水、海水等，用于测定水样中的五日生化需氧量（BOD5）。

二、引用标准
GB/T 601-1988 水质分析方法通则
GB/T 602-1988 水质样品的采集
GB/T 6682-2008 分析化学实验室通用规范
GB/T 11914-1989 水质样品的保存和运输
GB/T 11915-1989 水质样品的处理

三、定义
五日生化需氧量（BOD5）：在20℃下，水中有机物质在微生物的作用下，所需的氧气量，以每升水中的毫克氧气计算。

四、原理
将水样在一定条件下，接种一定数量的微生物，使水样中的有机物质在微生物的作用下分解，消耗氧气，测定消耗的氧气量，即为BOD5。

五、仪器和设备
1. 恒温培养箱
2. 恒温水浴器
3. 恒温振荡器
4. 恒温恒湿箱
5. 恒温恒湿器
6. 恒温恒湿培养箱
7. 恒温恒湿振荡器
8. 恒温恒湿水浴器
9. 恒温恒湿恒氧培养箱
10. 恒温恒湿恒氧振荡器
11. 恒温恒湿恒氧水浴器

六、试剂和材料
1. 硝酸钾（KNO3）
2. 磷酸二氢钾（KH2PO4）
3. 硫酸镁（MgSO4）
4. 硫酸铵（NH4）2SO4
5. 氯化钙（CaCl2）
6. 氯化铁（FeCl3）
7. 氯化钠（NaCl）
8. 氢氧化钠（NaOH）
9. 硫酸（H2SO4）
10. 氯仿（CHCl3）
11. 甲醇（CH3OH）
12. 玻璃棒
13. 滴定管
14. 称量器
15. 恒温恒湿箱
16. 恒温恒湿器
17. 恒温恒湿培养箱
18. 恒温恒湿振荡器
19. 恒温恒湿水浴器
20. 恒温恒湿恒氧培养箱
21. 恒温恒湿恒氧振荡器
22. 恒温恒湿恒氧水浴器

七、样品采集和处理
1. 样品采集应符合GB/T 602-1988的规定。
2. 样品应在采集后24小时内进行测定。
3. 样品应在4℃以下保存，保存时间不超过48小时。

八、操作步骤
1. 稀释法
（1）取适量的水样，加入适量的营养液，混匀。
（2）将混匀后的水样分装到BOD瓶中，每瓶加入适量的微生物接种液。
（3）将BOD瓶放入恒温恒湿箱中，恒温20℃，恒湿。
（4）在5天内，每天测定一次BOD值。
（5）测定BOD值时，先用氯仿抽取水样中的溶解氧，然后用硫酸将水样中的有机物氧化，再用氯仿提取溶解氧，测定溶解氧的差值即为BOD值。

2. 接种法
（1）取适量的水样，加入适量的营养液，混匀。
（2）将混匀后的水样分装到BOD瓶中，每瓶加入适量的微生物接种液。
（3）将BOD瓶放入恒温恒湿箱中，恒温20℃，恒湿。
（4）在5天内，每天测定一次BOD值。
（5）测定BOD值时，先用氯仿抽取水样中的溶解氧，然后用硫酸将水样中的有机物氧化，再用氯仿提取溶解氧，测定溶解氧的差值即为BOD值。

九、结果计算
1. 稀释法
BOD5=（a-b）×F
其中，a为第一次测定的溶解氧值，单位为mg/L；
b为第五天测定的溶解氧值，单位为mg/L；
F为稀释倍数。

2. 接种法
BOD5=（a-b）×F
其中，a为第一次测定的溶解氧值，单位为mg/L；
b为第五天测定的溶解氧值，单位为mg/L；
F为接种液的浓度。

十、质量控制
1. 样品的采集、保存、运输和处理应符合GB/T 11914-1989和GB/T 11915-1989的规定。
2. 试剂的质量应符合国家标准的规定。
3. 仪器和设备的使用应符合GB/T 6682-2008的规定。

相关标准
GB/T 601-1988 水质分析方法通则
GB/T 602-1988 水质样品的采集
GB/T 6682-2008 分析化学实验室通用规范
GB/T 11914-1989 水质样品的保存和运输
GB/T 11915-1989 水质样品的处理