GB/T 21768-2008
化学品 体外哺乳动物细胞DNA损伤与修复/非程序性DNA合成试验方法
发布时间:2008-05-12 实施时间:2008-09-01


DNA是生物体内的遗传物质,DNA的损伤会导致细胞死亡、突变、肿瘤等不良影响。因此,对于化学品的毒性评价和安全性评价,需要进行体外哺乳动物细胞DNA损伤与修复/非程序性DNA合成试验。

GB/T 21768-2008标准规定了体外哺乳动物细胞DNA损伤与修复/非程序性DNA合成试验方法。该标准主要包括以下内容:

1. 试验原理

本标准采用哺乳动物细胞体外培养技术,通过测定化学品对细胞DNA的损伤程度和细胞DNA修复能力,评价化学品对细胞DNA的毒性。

2. 试验方法

本标准采用非程序性DNA合成试验和DNA单链断裂试验两种方法进行化学品的毒性评价。

(1)非程序性DNA合成试验

非程序性DNA合成试验是通过测定化学品对细胞DNA合成的影响,评价化学品对细胞DNA的毒性。该试验方法主要包括以下步骤:

a. 培养细胞

b. 处理化学品

c. 洗涤细胞

d. 加入放射性核苷酸

e. 收集细胞

f. 测定放射性核苷酸的放射性计数

(2)DNA单链断裂试验

DNA单链断裂试验是通过测定化学品对细胞DNA单链断裂的影响,评价化学品对细胞DNA的毒性。该试验方法主要包括以下步骤:

a. 培养细胞

b. 处理化学品

c. 洗涤细胞

d. 提取DNA

e. 电泳分离DNA

f. 染色

g. 分析DNA单链断裂程度

3. 试验结果的判定

本标准根据非程序性DNA合成试验和DNA单链断裂试验的结果,评价化学品对细胞DNA的毒性。根据实验结果,将化学品分为五类:无毒性、低毒性、中等毒性、高毒性和极高毒性。

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