SPF鸡是指特殊病原体自由鸡,其繁殖、饲养、检测和管理均按照一定的标准进行。SPF鸡的微生物学监测是SPF鸡生产管理的重要环节,也是保证SPF鸡质量的重要手段之一。本标准规定了SPF鸡间接免疫荧光试验的方法,用于SPF鸡微生物学监测。
1. 试验原理
本试验采用间接免疫荧光法,利用荧光素标记的抗鸡IgG抗体与待检血清中的抗体结合,形成荧光素-抗体-抗体复合物,通过荧光显微镜观察荧光素的荧光强度,判断待检血清中是否存在特定病原体的抗体。
2. 试验步骤
(1)制备试验板:将荧光素标记的抗鸡IgG抗体加入试验板孔中,孵育后洗涤干净,加入待检血清和荧光素标记的抗鸡IgG抗体,孵育后洗涤干净。
(2)观察荧光:在荧光显微镜下观察试验板孔中荧光素的荧光强度,判断待检血清中是否存在特定病原体的抗体。
3. 试验结果判定
(1)阳性:试验板孔中有荧光素的荧光强度,且强度大于阴性对照孔。
(2)阴性:试验板孔中无荧光素的荧光强度,或强度小于阴性对照孔。
4. 试验注意事项
(1)试验板的制备和操作应在无菌条件下进行。
(2)试验板的荧光素标记的抗鸡IgG抗体应在4℃下保存,避免光照和冻融。
(3)待检血清应在4℃下保存,避免光照和冻融。
(4)试验板的荧光显微镜应调整好荧光素的荧光强度,避免过度曝光或欠曝光。
相关标准
GB/T 17999.1-2008 SPF鸡微生物学监测 第1部分:SPF鸡微生物学监测总则
GB/T 17999.2-2008 SPF鸡微生物学监测 第2部分:SPF鸡细菌学检测
GB/T 17999.3-2008 SPF鸡微生物学监测 第3部分:SPF鸡真菌学检测
GB/T 17999.4-2008 SPF鸡微生物学监测 第4部分:SPF鸡病毒学检测
GB/T 17999.5-2008 SPF鸡微生物学监测 第5部分:SPF鸡寄生虫学检测