牛传染性鼻气管炎病毒是一种常见的牛病毒，能引起牛的上呼吸道疾病，严重时可导致牛的死亡。为了及时发现和控制牛传染性鼻气管炎病毒的传播，需要对其进行检测。本标准规定了牛传染性鼻气管炎病毒实时荧光PCR检测方法，以提高检测的准确性和灵敏度。

1.范围
本标准适用于牛传染性鼻气管炎病毒的实时荧光PCR检测方法。

2.试剂和仪器
2.1 试剂
本标准所需试剂包括：牛传染性鼻气管炎病毒实时荧光PCR检测试剂盒、DNA提取试剂盒、PCR级水、质控DNA等。
2.2 仪器
本标准所需仪器包括：实时荧光PCR仪、离心机、超声波细胞破碎仪等。

3.样品采集和处理
3.1 样品采集
样品采集应在病牛发病后的3-5天内进行，采集鼻腔分泌物或鼻腔拭子。
3.2 样品处理
样品处理应在无菌条件下进行，避免污染。样品处理包括：样品收集、样品处理、DNA提取等步骤。

4.实验步骤
4.1 PCR反应体系
PCR反应体系包括：PCR反应液、模板DNA、引物和探针等。
4.2 PCR反应条件
PCR反应条件包括：预变性、PCR程序、数据分析等。
4.3 结果判定
根据实时荧光PCR仪的荧光信号，判断样品是否为阳性或阴性。

5.结果报告
结果报告应包括：样品编号、检测结果、检测时间、检测人员等信息。

相关标准
GB/T 27980-2011 牛传染性鼻气管炎病毒酶联免疫吸附试验检测方法
GB/T 27982-2011 牛传染性鼻气管炎病毒血清学检测方法
GB/T 27983-2011 牛传染性鼻气管炎病毒病原学检测方法
GB/T 27984-2011 牛传染性鼻气管炎病毒核酸检测方法
GB/T 27985-2011 牛传染性鼻气管炎病毒疫苗检测方法