GB/T 34757-2017
猪流行性腹泻 病毒RT-PCR检测方法
发布时间:2017-11-01 实施时间:2018-05-01
猪流行性腹泻是一种由猪流行性腹泻病毒(PEDV)引起的急性肠道传染病,主要通过口服感染途径传播。该病毒对猪的生产和养殖造成了严重的危害,因此对其进行快速、准确的检测具有重要意义。
本标准采用RT-PCR技术进行PEDV的检测。RT-PCR是一种基于聚合酶链反应(PCR)的技术,可以将RNA转录成cDNA,再进行PCR扩增。该技术具有高灵敏度、高特异性、快速、简便等优点,已成为病毒检测的主要手段之一。
本标准中,PEDV的RT-PCR检测方法主要包括以下步骤:
1. 样品处理:将样品进行处理,提取出其中的RNA。
2. RT-PCR反应体系配置:根据实验需要,配置RT-PCR反应体系,包括引物、酶、缓冲液等。
3. RT-PCR扩增:将反应体系加入PCR仪中,进行扩增反应。
4. 电泳分析:将PCR产物进行电泳分析,判断是否存在PEDV。
本标准还规定了PEDV的RT-PCR检测结果的判定标准和质量控制要求。其中,检测结果的判定标准包括阳性、阴性和无效三种情况。质量控制要求包括实验室环境、设备、试剂、人员等方面的要求。
本标准的实施可以为猪流行性腹泻的防控提供技术支持,保障猪的生产和养殖安全。
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