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一、范围
本标准规定了氧化铁纳米颗粒类过氧化物酶活性测量方法。

二、引用标准
GB/T 191-2008 纸和纸板试样的制备
GB/T 6682-2008 分析化学实验室水质规范及评价
GB/T 20394-2006 纳米材料术语和定义
GB/T 22931-2008 纳米材料的粒径和尺寸分布的测量方法
GB/T 31774-2015 纳米颗粒类生物效应评价技术导则

三、术语和定义
本标准所涉及的术语和定义，参见GB/T 20394-2006。

四、原理
将氧化铁纳米颗粒与过氧化物酶反应，过氧化物酶催化过氧化氢分解为氧气和水，氧气与荧光素反应，产生荧光信号，测量荧光信号强度，计算出过氧化物酶活性。

五、仪器和设备
5.1 荧光分析仪：激发波长为340 nm，发射波长为510 nm。
5.2 离心机：最高转速为10000 r/min。
5.3 超声波清洗器：功率为100 W，频率为40 kHz。

六、试验步骤
6.1 样品制备
按GB/T 191-2008的要求制备样品。
6.2 样品处理
将样品加入离心管中，离心10 min，去除上清液，加入0.1 mol/L PBS缓冲液，超声波清洗3次，离心10 min，去除上清液，加入0.1 mol/L PBS缓冲液，制备样品悬浮液。
6.3 试剂配置
6.3.1 过氧化氢（H2O2）：浓度为10 mmol/L。
6.3.2 荧光素（FL）：浓度为10 mmol/L。
6.3.3 过氧化物酶（POD）：浓度为100 U/mL。
6.3.4 PBS缓冲液：pH值为7.4。
6.4 试验操作
6.4.1 取样品悬浮液1 mL，加入0.1 mL的H2O2，混匀。
6.4.2 加入0.1 mL的FL，混匀。
6.4.3 加入0.1 mL的POD，混匀。
6.4.4 放入荧光分析仪中，记录荧光信号强度。
6.5 数据处理
计算出过氧化物酶活性。

七、结果表示
结果应包括样品的过氧化物酶活性值和荧光信号强度值。

八、精密度和准确度
8.1 精密度
同一实验室内，重复测量5次，计算相对标准偏差（RSD）。
8.2 准确度
将已知浓度的POD加入样品中，测量过氧化物酶活性，计算回收率。

九、质量控制
9.1 仪器校准
每次使用前，应进行荧光分析仪的校准。
9.2 试剂质量控制
试剂应符合GB/T 6682-2008的要求。

十、实验报告
实验报告应包括以下内容：
10.1 样品的来源、名称、规格、数量等。
10.2 实验条件，包括温度、湿度、光照等。
10.3 试验步骤。
10.4 结果，包括过氧化物酶活性值和荧光信号强度值。
10.5 精密度和准确度。
10.6 结论。

相关标准：
GB/T 20394-2006 纳米材料术语和定义
GB/T 22931-2008 纳米材料的粒径和尺寸分布的测量方法
GB/T 31774-2015 纳米颗粒类生物效应评价技术导则
GB/T 191-2008 纸和纸板试样的制备
GB/T 6682-2008 分析化学实验室水质规范及评价