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一、范围
本标准适用于入出境船舶压舱水中大肠菌群的测定。

二、引用标准
GB/T 601-2002 分析化学通用实验方法

三、定义
3.1 压舱水
指船舶在航行中为保持平衡而进出舱室的水。

3.2 大肠菌群
指属于肠杆菌科的革兰氏阴性杆菌，包括大肠杆菌、奇异变形杆菌、肠球菌等。

四、原理
将压舱水经过膜过滤器过滤，将过滤后的膜放置于含有大肠菌群培养基的平板上进行培养，经过一定时间后，计算平板上大肠菌群的数量，从而计算出压舱水中大肠菌群的浓度。

五、仪器和设备
5.1 膜过滤器：孔径为0.45μm的膜过滤器。
5.2 平板培养基：含有大肠菌群培养基的平板。
5.3 恒温培养箱：温度为35±1℃。

六、试剂和材料
6.1 大肠菌群培养基
6.2 无菌生理盐水
6.3 无菌滤纸

七、操作步骤
7.1 取样
取船舶压舱水样品，避免样品受到外界污染。

7.2 过滤
将取样的压舱水经过膜过滤器过滤，将过滤后的膜放置于含有大肠菌群培养基的平板上进行培养。

7.3 培养
将平板放置于恒温培养箱中，温度为35±1℃，培养时间为24±2小时。

7.4 计数
在培养时间结束后，使用无菌滤纸将平板上的菌落转移到无菌生理盐水中，进行稀释，然后在含有大肠菌群培养基的平板上进行涂布，再次进行培养，计算菌落的数量。

八、结果计算
压舱水中大肠菌群的浓度，以CFU/100mL为单位计算，计算公式如下：
C = N/V×D
其中，C为大肠菌群的浓度，单位为CFU/100mL；
N为平板上计数的菌落数；
V为取样的压舱水体积，单位为mL；
D为平板上菌落的稀释倍数。

九、质量控制
9.1 平行样品
在同一批次的实验中，取两个样品进行平行测试，结果应该相近。

9.2 对照样品
每批次实验中，应该设置对照样品，以检验实验的准确性和可靠性。

十、实验报告
实验报告应包括以下内容：
10.1 样品的来源、取样时间和地点；
10.2 实验方法和步骤；
10.3 实验结果和数据处理；
10.4 结论和建议。

相关标准：
GB/T 28229-2011 膜过滤法测定水中大肠菌群
GB/T 28231-2011 膜过滤法测定水中肠球菌
GB/T 28232-2011 膜过滤法测定水中奇异变形杆菌
GB/T 28233-2011 膜过滤法测定水中肠杆菌
GB/T 28234-2011 膜过滤法测定水中沙门氏菌