GB/T 34799-2017
几丁质酶活性检测方法
发布时间:2017-11-01 实施时间:2018-05-01


几丁质酶是一种水解几丁质的酶,广泛存在于真菌、细菌、植物和动物中。几丁质酶在生物化学分析和酶学分析中具有重要的应用价值。本标准旨在规范几丁质酶活性检测的方法,确保检测结果的准确性和可靠性。

1.范围
本标准适用于从各种来源中提取几丁质酶并测定其活性。

2.提取几丁质酶
2.1 样品的制备
将待测样品粉碎并筛选,取适量的样品称重,加入适量的缓冲液,混匀后放置一段时间,使几丁质酶充分释放。
2.2 几丁质酶的提取
将混合物离心,取上清液,加入适量的酶提取液,混匀后放置一段时间,使几丁质酶充分溶解。
2.3 几丁质酶的纯化
将提取液进行纯化,去除杂质和不相关的酶,得到纯净的几丁质酶。

3.测定几丁质酶活性
3.1 反应体系的制备
将适量的底物和酶液混合,加入适量的缓冲液,混匀后放置一段时间,使反应体系充分混合。
3.2 反应的进行
将反应体系放置在适当的温度下进行反应,反应时间根据实际情况确定。
3.3 反应的终止
加入适量的终止液,停止反应。
3.4 反应产物的检测
使用适当的检测方法检测反应产物,根据产物的浓度计算几丁质酶的活性。

4.结果的计算
根据反应产物的浓度计算几丁质酶的活性,活性的单位为U/g。

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