动物制品中的动物源性成分检测是保障食品安全的重要手段之一。传统的检测方法主要依靠形态学、生理学和生物化学等手段,但这些方法存在着操作繁琐、耗时长、易受到环境因素干扰等缺点。而基因条码技术则可以通过对特定基因序列的检测,快速、准确地鉴定样品中的动物源性成分。
本标准规定了动物制品中动物源性检测基因条码技术 Sanger测序法的要求和方法。该方法主要包括以下步骤:
1. 样品处理:样品应当经过充分混匀后,取适量样品进行处理。对于不同类型的样品,处理方法也有所不同,如对于肉类样品,应当去除骨头、脂肪等杂质,对于液态样品,应当进行离心等处理。
2. DNA提取:样品处理后,应当进行DNA提取。本标准推荐使用商用DNA提取试剂盒进行提取,也可以根据实际情况选择其他适合的提取方法。提取后的DNA应当经过纯化、浓缩等处理,以保证后续步骤的准确性。
3. PCR扩增:提取的DNA应当进行PCR扩增,以扩增目标基因片段。本标准推荐使用COI基因作为扩增目标,也可以根据实际情况选择其他适合的基因。PCR扩增应当进行负对照、正对照等控制,以保证扩增结果的准确性。
4. 测序反应:PCR扩增后的产物应当进行测序反应,以获取目标基因序列。本标准推荐使用Sanger测序法进行测序,也可以根据实际情况选择其他适合的测序方法。测序反应应当进行负对照、正对照等控制,以保证测序结果的准确性。
5. 数据分析:测序反应后,应当对测序结果进行数据分析。数据分析应当包括序列质量控制、序列比对、物种鉴定等步骤。本标准推荐使用BLAST等软件进行数据分析,也可以根据实际情况选择其他适合的软件。
本标准还规定了样品数量、实验室环境、实验人员等要求,以保证检测结果的准确性和可靠性。
相关标准
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