GB/T 30987-2020
植物中游离氨基酸的测定
发布时间:2020-03-31 实施时间:2020-03-31


植物中的游离氨基酸是植物体内重要的代谢产物,对植物的生长发育和抗逆性具有重要的作用。因此,准确测定植物中游离氨基酸的含量对于研究植物生理生化过程具有重要意义。

本标准采用高效液相色谱法测定植物中游离氨基酸的含量。具体操作步骤如下:

1. 样品的制备

将植物样品取出,用液氮粉碎成细粉末,称取0.1g左右的样品,加入10mL的0.1mol/L盐酸溶液中,用超声波处理30min,然后离心10min,取上清液备用。

2. 样品的分析

将上述制备好的样品上清液过滤,取1mL加入2mL的0.2mol/L硼酸-氢氧化钠缓冲液中,加入荧光素异硫氰酸酯(FMOC-Cl)溶液,室温下反应10min,然后加入氨水调节pH值至8.0左右,离心10min,取上清液进行高效液相色谱分析。

3. 高效液相色谱分析

采用C18反相色谱柱,流动相为甲醇-0.1mol/L乙酸铵缓冲液(pH=6.0),梯度洗脱,检测波长为266nm,柱温为40℃,流速为1.0mL/min,进样量为10μL,分析游离氨基酸的含量。

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