多肽是一类由氨基酸组成的生物大分子,具有广泛的生物活性,包括抗菌、抗病毒、抗肿瘤等。多肽抗菌性测定是评价多肽抗菌活性的重要方法之一。本标准介绍了多肽抗菌性测定的抑菌圈法。
1. 范围
本标准适用于多肽抗菌性能的测定。
2. 原理
将待测多肽溶液均匀涂布于琼脂平板上,使其充分吸收,然后在琼脂平板上均匀涂布一层含有待测菌株的细菌悬液,使其在琼脂平板上生长。在细菌生长后,观察多肽对菌株的抑制作用,测定抑菌圈直径,从而评价多肽的抗菌性能。
3. 试验材料和设备
3.1 试验材料
(1)多肽样品
(2)琼脂平板
(3)细菌悬液
3.2 试验设备
(1)无菌操作台
(2)恒温培养箱
(3)显微镜
(4)千分尺
4. 试验步骤
4.1 准备琼脂平板
将琼脂平板加热至液态状态,冷却至50℃左右,加入适量的细菌悬液,混匀后倒入培养皿中,待凝固后放入恒温培养箱中培养。
4.2 准备多肽样品
将待测多肽样品溶解在适量的缓冲液中,制备成一定浓度的多肽溶液。
4.3 涂布多肽溶液
将多肽溶液均匀涂布于琼脂平板上,使其充分吸收。
4.4 涂布细菌悬液
在琼脂平板上均匀涂布一层含有待测菌株的细菌悬液,使其在琼脂平板上生长。
4.5 观察抑菌圈
在细菌生长后,观察多肽对菌株的抑制作用,测定抑菌圈直径,从而评价多肽的抗菌性能。
5. 结果计算
根据测定的抑菌圈直径,计算多肽的抗菌活性。
6. 结论报告
报告多肽的抗菌活性,包括抑菌圈直径和抗菌活性评价。
相关标准
GB/T 4789.2-2016 食品安全国家标准 食品微生物学 检验方法 第2部分:肠道致病菌的检验
GB/T 4789.3-2016 食品安全国家标准 食品微生物学 检验方法 第3部分:食品中真菌和酵母菌的检验
GB/T 4789.4-2016 食品安全国家标准 食品微生物学 检验方法 第4部分:食品中耐热腐败菌的检验
GB/T 4789.5-2016 食品安全国家标准 食品微生物学 检验方法 第5部分:食品中致病性非肠道致病菌的检验
GB/T 4789.10-2016 食品安全国家标准 食品微生物学 检验方法 第10部分:食品中大肠杆菌的检验