GB/T 40186-2021
微生物诱变育种致遗传物质损伤强度测定 Umu法
发布时间:2021-05-21 实施时间:2021-12-01
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微生物诱变育种是一种通过诱变剂诱导微生物基因突变,从而获得新的菌株或改良已有菌株的方法。该方法已广泛应用于微生物发酵工业、环境修复、生物农药等领域。然而,微生物诱变育种也可能会导致遗传物质的损伤,因此需要对其进行评估。
GB/T 40186-2021标准规定了一种测定微生物诱变育种致遗传物质损伤强度的方法,即Umu法。该方法利用大肠杆菌中的UmuC蛋白,通过测定其对紫外线诱导的突变的修复能力,来评估微生物诱变育种对遗传物质的损伤程度。
具体操作步骤如下:
1.准备试样:将待测微生物菌株培养至对数生长期,收集细胞,洗涤后悬浮于缓冲液中。
2.处理试样:将试样分为两组,一组暴露于诱变剂,另一组作为对照组。暴露时间和诱变剂浓度应根据实际情况确定。
3.测定突变频率:将处理后的细胞悬液分别接种于含有适当抗生素的琼脂平板上,培养至菌落形成。根据菌落数计算突变频率。
4.测定修复能力:将处理后的细胞悬液分别暴露于紫外线,然后接种于含有适当抗生素的琼脂平板上,培养至菌落形成。根据菌落数计算修复能力。
5.计算遗传物质损伤强度:根据突变频率和修复能力计算遗传物质损伤强度。
本标准适用于微生物诱变育种致遗传物质损伤强度的测定,可用于评估微生物诱变育种的安全性和效果。
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