GB/T 40173-2021
水溶性壳聚糖中还原性端基糖的测定 分光光度法
发布时间:2021-05-21 实施时间:2021-12-01


水溶性壳聚糖是一种天然高分子多糖,具有广泛的应用前景。其中还原性端基糖是水溶性壳聚糖的重要组成部分,其含量的测定对于水溶性壳聚糖的质量控制和应用具有重要意义。本标准规定了水溶性壳聚糖中还原性端基糖的测定方法,采用分光光度法进行测定。

1.范围
本标准规定了水溶性壳聚糖中还原性端基糖的测定方法。

2.标准要求
2.1 仪器和试剂
2.1.1 分光光度计:选择波长为540nm的分光光度计。
2.1.2 量筒:容量为10mL。
2.1.3 称量仪器:精度为0.0001g。
2.1.4 硫酸:质量分数为98%。
2.1.5 蒸馏水:用于制备试剂和洗涤仪器。
2.1.6 葡萄糖标准溶液:浓度为1mg/mL。
2.1.7 水溶性壳聚糖样品:经过干燥处理,粉末状。

2.2 试剂的制备
2.2.1 硫酸试剂:取硫酸10mL,加入蒸馏水至100mL,混合均匀。
2.2.2 葡萄糖标准溶液:取葡萄糖1mg,加入蒸馏水稀释至10mL,混合均匀。

2.3 样品的处理
2.3.1 取水溶性壳聚糖样品0.1g,加入10mL的硫酸试剂中,混合均匀。
2.3.2 将样品溶液加热至95℃,保持10min,冷却至室温。
2.3.3 将样品溶液转移至10mL量筒中,用蒸馏水稀释至刻度线,混合均匀。

2.4 测定
2.4.1 取葡萄糖标准溶液0.1mL,加入10mL的硫酸试剂中,混合均匀,作为标准曲线的浓度为0.01mg/mL。
2.4.2 取样品溶液1mL,加入10mL的硫酸试剂中,混合均匀,作为样品溶液。
2.4.3 取分光光度计比色皿,加入样品溶液1mL和蒸馏水9mL,混合均匀,作为空白对照组。
2.4.4 分别取标准曲线中不同浓度的葡萄糖标准溶液0.1mL,加入分光光度计比色皿中,加入蒸馏水9mL,混合均匀,测定吸光度值。
2.4.5 分别取样品溶液中不同浓度的还原性端基糖0.1mL,加入分光光度计比色皿中,加入蒸馏水9mL,混合均匀,测定吸光度值。
2.4.6 根据标准曲线计算样品中还原性端基糖的含量。

3.结果的计算
3.1 标准曲线的绘制
将标准曲线中不同浓度的葡萄糖标准溶液的吸光度值作为纵坐标,浓度值作为横坐标,绘制标准曲线。
3.2 样品中还原性端基糖的含量的计算
根据样品溶液的吸光度值和标准曲线计算样品中还原性端基糖的含量。

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